树鼩腺病毒Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

目的:通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan 实时荧光定量PCR 检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒。
 
方法:根据TAV 全基因组3’端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV TaqMan 实时荧光定量PCR 检测方法。
 
结果:建立的TAV 实时荧光定量PCR 检测方法特异性好,与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应;方法的最低检测限度为每微升3.7 拷贝,灵敏性强;相关检测系数R2 为0.998,扩增效率为95.7%;扩增结果具有良好的线性关系,且重复性检测效果好。
 
结论:成功建立了TAV TaqMan 实时荧光定量PCR 检测方法,灵敏度高,重复性好,可用于TAV 感染的早期快速检测。
 
 
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