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预立医学每周精选一篇文献为您进行详细解读

来源/预立医学郝鹤

各位朋友，大家好，又到了医周解文的时间啦，本周给大家带来的是一篇关于食管癌（esophageal cancer）基础研究的文章， 2016年6月接受于Cancer Letters，影响因子5.992。

文章题目为Qigesan inhibits migration and invasion of esophageal cancer cells via inducing connexin expression and enhancing gap junction function （启膈散通过诱导蛋白表达并提高间隙连接功能，进而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭的研究）

期刊介绍

Cancer Letters

IF：5.992

影响因子趋势：

出版周期：双周刊

审稿速度：一般4-8周

偏重方向：肿瘤，肿瘤分子生物学

期刊主页：http://www.cancerletters.info/

研究亮点

文章验证了启膈散对食管癌细胞有明显的抑制作用，并进一步找到了启膈散作用的相关因子。

研究思路

启膈散，主治噎膈。咽下梗塞，食入即吐，或朝食暮吐，胃脘胀痛，舌绛少津，大便干结者，是我国传统医药配方，出自《医学心悟》卷三，一直被用来治疗食管癌患者。

然而，启膈散的抗癌机制尚不清楚。这项研究的目的是确定启膈散是否调节间隙连接功能，并影响食管癌细胞的侵袭。

随后实验表明，启膈散显着抑制食管癌细胞在体外的迁移和侵袭。进一步的研究表明启膈散增强了食管癌细胞GJ的功能。因此推测，增强连接蛋白表达导致增强GJ功能和转移的抑制作用。

该研究发现，启膈散增强了食管癌细胞连接蛋白26和连接蛋白43的表达。这项研究表明，通过启膈散增强连接蛋白的表达，从而降低食管癌细胞迁移和侵袭增加GJ功能。

结果分析

启膈散有效作用浓度验证

在本论文研究中，首先使用不同浓度（1, 3, 10, 30, 50, or 100 μg/mL)的启膈散 (QGS) 抑制不同种类的食管癌癌癌细胞系（Eca109, TE13 and TE1），用Transwell system检测他们的侵染情况，结果发现，当启膈散的浓度达到50, 100 μg/mL时，抑制效果明显。

QGS对食管癌细胞系迁移情况分析

之后，对QGS对食管癌细胞系迁移情况进行了分析，通过Scratch-Wound Assay验证了在给于0, 50,or 100 μg/mL QGS 时Eca109, TE13 and TE1 cells.（A 0, 12 and 24 h的显微照片；B柱图。），结果表明，与对照组相比QGS（50和100μg/mL）显著延迟了伤口的闭合。以上两个实验说明，QGS可以有效的抑制食管癌细胞的入侵与迁移。

启膈散作用机理探究

为了进一步研究其作用机理，使用了 “Parachute” dye-coupling assay这种可视化的方法检测GJ介导的细胞间的信息传导。荧光强度越大说明GJ的介导作用越强。该结果说明QGS的处理增强了GJIC（GJ-mediated intercellular communication） (p < 0.05 at 50 μg/mL and 50 and p < 0.01 at 100μg/mL).

QGS 处理促进食管癌细胞间信号的交换

为了验证QGS 处理是否促进了食管癌细胞间信号的交换，Lucifer yellow是主要的显色物质，Scrape loading/dye transfer assays显示100μg/mL QGS处理时的荧光信号比较强。这个结果暗示了QGS 增强 GJ的功能是由于GJIC信号激发产生的。

前人的研究表明，连接蛋白是肿瘤抑制中调节细胞粘附和迁移的重要环节。该研究使用Western blot分析CX43和CX26蛋白的表达。结果显示，QGS处理显著增加了Cx26基因和Cx43的蛋白的表达（属于剂量依赖性），50μg/mL的 QGS足以诱导在所有三个测试的细胞系Cx26和Cx43基因的表达。